常见问题解答

我们知道高温高压灭菌是最常用的灭菌方法，121°C，15-20min 是这一过程中最常用的标准条件。高压灭菌器最早问世于1879年，当时是通过压力表来控制灭菌过程，灭菌的条件用的是压力单位，一般国内用1 kg/cm2表示，相当于1个标准大气压=1bar=1 kg/cm2=0.1 MPa=14.5 psi，常用的高压灭菌条件指的是2个大气压下水的沸点值，这个值接近121℃，那为何最后偏偏选了121而不是120或者122℃呢？实际上是因为美国使用的是华氏温度，灭菌时使用的温度是250℉，根据华氏度和摄氏度换算250℉=121.1℃。121°C就是这么得来的，那么你清楚高温灭菌的渊源吗？

呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus, RSV）是一种非节段性的单股负链RNA病毒，属于副粘病毒科（Paramyxoviridae），肺炎病毒属。RSV可在全球范围内引起婴幼儿、老年人和免疫功能低下者呼吸道感染，是5岁以下儿童下呼吸道感染的主要致病原因，每年导致约3300万例下呼吸道感染病例，其中中国约占十分之一，即350万例。RSV 感染在全球范围内的广泛流行，对 5 岁以下儿童和 65 岁及以上老年人造成了较重的疾病负担。

流感病毒属于正黏病毒科，为有包膜的负链RNA病毒，根据抗原特性可分为甲型、乙型、丙型和丁型流感病毒。其中对人类健康威胁最大的是甲型流感病毒。流感病毒在全球每年导致29万~65万例呼吸道疾病相关死亡。

登革热病毒（Dengue Virus, DENV）属于黄病毒科中的黄病毒属，是一种核糖核酸（RNA）病毒。黄病毒属包括西尼罗河病毒 (WNV)、日本脑炎病毒 (JEV)、蜱传脑炎病毒 (TBEV) 和黄热病毒 (YFV)。登革热病毒通过埃及伊蚊和白纹伊蚊传播，引发从轻度的登革热（DF）到致命的登革出血热（DHF）或登革休克综合征（DSS）。DENV主要分为四种血清型（DENV 1-4），不同血清型的抗原性略有不同。病毒基因组由约 11kb的单股正链RNA组成，编码3种结构蛋白（C、prM和E），这些蛋白构成病毒体的组成部分，以及7种参与病毒RNA复制的非结构蛋白（NS1、NS2A/B、NS3、NS4A/B、NS5）。

一抗，即第一抗体，是一种能够与非抗体性抗原（即特异性抗原）特异性结合的蛋白，主要分为单克隆抗体和多克隆抗体两大类。一抗可以特异性地结合底物，识别出我们想要检测的蛋白。检测任何靶蛋白都有多种抗体可供选择，那如何进行一抗的选择呢？

在进行免疫组化实验时，可能会遇到多种结果异常情况，包括阴性结果、非特异性染色、假阳性和弱阳性等。这些异常结果可能是由多种因素引起的，涉及样本处理、抗体选择、实验操作、检测系统等多个方面。

UniProt数据库全称Universal Protein，是由欧洲生物信息研究所（EMBL-EBI）、瑞士苏黎世大学的Swiss Institute of Bioinformatics（SIB）和美国国家生物技术信息中心（NCBI）三家机构合作维护的知识库，旨在整合、注释和提供全面的蛋白质序列及相关功能信息。

前几期和科研宝子们分享了co-IP、GST-Pull down、SPR以及BLI实验，这一期小编带大家了解另一种常见的互作实验——酵母双杂。酵母双杂交系统是一种强大的遗传学工具，用于检测蛋白质之间的相互作用。凭借其在生理条件下检测蛋白质直接相互作用的能力、低假阳性率以及高成本效益比，成为了探索蛋白质网络、加速药物发现与功能基因组学研究不可或缺的强大工具。

生物层干涉技术（Biolayer Interferometry, BLI）是一种实时的、无标记的生物分子相互作用分析方法。主要应用于量化蛋白质、核酸、多糖和其他生物分子之间的动态结合反应，提供有关结合亲和力、速率常数和稳定性的重要信息。

前两期和科研宝子们分享了co-IP实验和GST-Pull down实验，这一期小编带大家了解另一种常见的互作实验——SPR。表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance, SPR）技术凭借其无标记、实时监控、高灵敏度等特点，在过去数十年里迅速崛起，成为探究蛋白质、核酸、小分子药物等生物大分子相互作用的强大工具。