在流式细胞术中,抗体的选择直接决定实验结果的准确性与可重复性。而在众多抗体参数中,克隆号(Clone ID)是一个至关重要但常被忽视的关键因素。克隆号代表了抗体的来源和特性,直接影响抗体的特异性、灵敏度和实验表现。本文将解析为什么在选购流式抗体时需要关注克隆号,以及克隆号对实验成功的重要性。
什么是克隆号?
克隆号是指单克隆抗体的来源标识,每一种克隆号代表一组从单个B细胞克隆分离出的抗体。由于这些抗体来自同一个B细胞克隆,它们对目标抗原的识别具有完全相同的特异性和亲和力。
选择流式抗体时克隆号的重要性
■ 保证实验的特异性
不同的克隆号对应不同的抗体特异性。即使抗体针对相同的目标分子(如CD4、CD8等),不同克隆号可能识别靶分子上的不同表位。如果使用错误的克隆号,可能导致非特异性结合或无法识别目标分子,影响实验结果。例如:针对CD3的抗体,不同克隆号如OKT3和UCHT1识别不同的表位,实验结果可能显著不同。
■确保实验的重复性
克隆号的统一可以保证抗体的来源和特性稳定,避免因批次或供应商的变化导致实验结果不一致。特别是在多中心研究或临床研究中,使用相同克隆号的抗体能够提高实验的可比性和数据可靠性。
■适配特定的实验需求
某些克隆号的抗体表现出独特的性能,适用于特定实验。例如:在检测肿瘤微环境中的稀有CD8+ T细胞时,克隆号63H6表现出了卓越的灵敏度。由于肿瘤组织中的CD8抗原表达通常较低,63H6能够以其高亲和力精准识别这些低丰度抗原,在肿瘤浸润性T细胞(TILs)分析中得到了广泛应用。
■优化多色实验设计
多色流式细胞术中,不同克隆号的抗体可用于避免表位竞争。例如,HIB19 克隆针对 CD19,而 L243 克隆针对 HLA-DR,两者识别不同的表位,适合同时使用。有文文献表明,L243 克隆的抗体结合于 HLA-DR 分子的特定构象表位,不与 HLA-DP 和 HLA-DQ 交叉反应,适用于多色流式细胞术中的抗原检测。
克隆号与供应商之间的关系
■相同克隆号的抗体来自不同品牌
市场上许多抗体供应商销售相同克隆号的抗体,但其性能可能因生产工艺或荧光标记质量的差异而有所不同。因此,在选择抗体时,建议参考文献中常用的克隆号,并优先选择具有良好用户评价的供应商。
■供应商独家克隆号
部分供应商拥有独家克隆号,这些克隆号通常经过特殊优化或验证。以AntibodySystem为例,其SAA系列抗体包含部分独家克隆号,这些克隆号在多色流式实验中表现出色,且适配性强。
如何选择适合的克隆号?
■查询文献或数据库
在实验设计前,可以通过查询流式抗体数据库(如BD、BioLegend)或文献中使用的抗体克隆号,选择被广泛验证的克隆号。
■明确实验需求
是否需要检测特定抗原的特定表位?
是否需要适配固定细胞或其他实验条件?
■参考供应商信息
不同供应商对克隆号抗体的标记物种类和稳定性存在差异,可以根据实验需求选择合适的荧光标记或共轭抗体。
■评估荧光标记稳定性
确保克隆号对应的抗体染料标记强度稳定,特别是在多色流式中避免荧光串扰。
推荐:AntibodySystem SAA系列抗体中的克隆号优势
AntibodySystem SAA系列流式抗体 在克隆号选择和产品优化上表现卓越,其产品以高质量、高稳定性闻名,尤其适用于需要高灵敏度和高特异性的实验。
■经典克隆号覆盖:SAA系列涵盖广泛使用的经典克隆号,如Anti-CD4(GK1.5克隆)、Anti-CD19(SJ25-C1克隆)。
■独家优化克隆号:部分克隆号经过专利优化,适配多种实验条件。
■稳定的荧光标记:提供丰富的荧光标记选择,如FITC、PE、APC等,满足多色流式需求。
■高重复性验证:严格质控,确保批次间数据的一致性。
热销产品推荐:
Target |
Clone Number |
Species |
CAT. |
Application |
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CD4 |
GK1.5 |
Mouse |
FMB95910 |
小鼠CD4+ T细胞检测经典克隆号,用于多色流式细胞术,支持低丰度细胞检测,适合固定和新鲜样本。 |
FMB95912 |
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FMB95914 |
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FMB95913 |
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FMB95911 |
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OKT4A |
Human |
FHB95932 |
用于检测人类CD4+ T细胞,适合多色流式实验和免疫表型分析,可评估活化状态,固定样本中表现优异。 | |
FHB95934 |
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FHB95933 |
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FHB95931 |
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PD-1 |
29F.1A12 |
Mouse |
FMH02220 |
小鼠PD-1检测经典克隆号,适用于功能研究、肿瘤免疫和药物筛选,支持多色实验和PD-1/PD-L1信号通路研究,高灵敏度适合基础研究。 |
FMH02222 |
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FMH02224 |
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FMH02223 |
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FMH02221 |
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RMP1-14 |
Human |
FHH02212 |
检测人类T细胞PD-1表达,广泛应用于肿瘤免疫监测和免疫治疗评估,适合多参数检测及分析免疫抑制信号,新鲜和固定样本均适用。 | |
FHH02214 |
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FHH02213 |
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FHH02211 |
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HLA-DR |
L243 |
Human |
FHM03312 |
经典HLA-DR克隆号,用于APCs鉴定和分型,支持多色流式及免疫表型分析,适合肿瘤免疫和炎症研究,固定样本中信号稳定。 |
FHM03314 |
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FHM03313 |
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FHM03311 |
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CD8 |
G10-1 |
Human |
FHK18512 |
用于检测CD8+ T细胞,适合肿瘤微环境和免疫治疗评估,支持复杂多色实验和亚群精确分析,流式细胞术中稳定可靠。 |
FHK18514 |
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FHK18513 |
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FHK18511 |
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