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货号
BLBP00013
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描述
IdeZ Protease全称免疫球蛋白G降解酶(Immunoglubulin G-degrading enzyme of Streptococcus equi subspecieszooepidemicus, IdeZ)。该蛋白酶具有极高的底物特异性,仅能识别IgG,在抗体下铰链区的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab’)2片段和Fc片段。IdeZ蛋白酶可有效切割人IgG1、 IgG2、 IgG3和 IgG4,还可以切割猴、羊、兔、人源化和嵌合 IgG以及Fc融合蛋白。与IdeS蛋白酶相比,IdeZ蛋白酶对小鼠IgG2a和IgG3的活性显着提高。IdeZ具有独特的底物选择性,可以作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。本产品利用大肠杆菌重组表达,纯度高,具有良好的酶切活性,是用于表征治疗性抗体、Fc融合蛋白和抗体药物复合物的有价值的工具。
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生物活性
在37℃条件下,反应30min,剪切>95%的1μg重组单克隆IgG所需要的酶量定义为一个活性单位。 -
种属
Streptococcus equi -
蛋白长度
IdeZ Protease is cloned from Streptococcus equi and expressed in E.coli. -
预测分子量
38 kDa -
浓度
50U/μL -
应用
IdeZ Protease特异性识别所有人、羊、猴和兔的IgG亚类,在IgG铰链区以下的单个识别位点特异性切割,使IgG水解为完整的F(ab´)2和Fc片段。IdeZ蛋白酶比IdeS更有效地切割小鼠IgG2a。 -
状态
Liquid -
保存溶液
PBS pH 7.5,50%glycerol。 -
实验操作流程
酶切反应条件 37℃酶切30min 抗体片段化使用建议: 1. 在消化缓冲液或其他适合的缓冲液中加入适量IgG(最大量5mg); 2. 在IgG样本中加入IdeZ蛋白酶:每1μg IgG加入1个单位的IdeZ; 3. 将样品置于37℃孵育30-60min。IdeZ蛋白酶在中性pH或接近中性pH的缓冲中活性最强。推荐反应缓冲是50mM磷酸钠,150mM NaCl(pH6.6),也可以使用许多常见的生物缓冲液,比如Tris或PBS。在使用此pH范围以外的缓冲液(例如醋酸盐缓冲液)时,孵育时间或酶量需要根据实际情况进行优化。 注意事项: 1.IgG的理想浓度应在1-20mg / ml的范围内; 2.IdeZ蛋白酶有效切割人,人源化,嵌合,绵羊,兔和猴子的IgG以及小鼠IgG2a和IgG3。 IdeZ蛋白酶还将裂解许多Fc融合蛋白以及抗体-药物偶联物(ADC); 3.IdeZ蛋白酶不切割小鼠IgG1 / IgG2b,大鼠,猪,牛或山羊IgG。IdeZ蛋白酶也不会裂解非IgG同种型,包括IgA,IgM,IgD和IgE; 4.IdeZ蛋白酶具有组氨酸标签,易于去除; 5. IdeZ蛋白酶可与PNGase F(Catalogue No. ATE00005)一起用于同一反应中,使用推荐的消化缓冲液一步一步完成Fc聚糖的片段化和去除。
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运输
蓝冰运输 -
别名
IdeZ Protease,Immunoglobulin-degrading Enzyme,IgG Specific,IdeZ,免疫球蛋白特异性IdeZ酶,免疫球蛋白IgG降解酶
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SDS-PAGESDS PAGE for IdeZ Protease