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货号
BLBP00012
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描述
IdeS Protease全称免疫球蛋白G降解酶（Immunoglubulin G-degrading enzyme ofStreptococcus pyogenes, IdeS），是由人类致病菌酿脓链球菌（Streptococcuspyogenes）产生并分泌至胞外的一种半胱氨酸水解酶。该蛋白酶具有极高的底物特异性，仅能识别IgG，在抗体下铰链区的特定位点进行酶切，使IgG水解为完整的F(ab’)2片段和Fc片段。IdeS可识别人源和其他多种动物来源的IgG，比如鼠、兔、猴、羊以及人动物嵌合IgG等。IdeS具有独特的底物选择性，可以作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。本产品利用大肠杆菌重组表达，纯度高，具有良好的酶切活性，是用于表征治疗性抗体、Fc融合蛋白和抗体药物复合物的有价值的工具。
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生物活性
在37℃条件下，反应30min，剪切＞95%的1ug重组单克隆IgG所需要的酶量定义为一个活性单位。 -
种属
Streptococcus pyogenes -
蛋白长度
IdeS Protease is cloned from Streptococcus pyogenes and expressed in E.coli. -
预测分子量
38 kDa -
浓度
40U/μL -
应用
IdeS Protease特异性识别所有人、羊、猴和兔的IgG亚类，在IgG铰链区以下的单个识别位点特异性切割，使IgG水解为完整的F(ab’)2片段和Fc片段 -
状态
Liquid -
保存溶液
PBS pH 7.4，50%glycerol -
实验操作流程
酶切反应条件
37℃酶切30min
1. 在消化液中加入适量IgG(加至5mg)；
2. 在IgG样本中加入IdeS蛋白酶：每1ug IgG加入1个单位的IdeS；
3. 将样品置于37℃孵育30-60min。IdeS蛋白酶在中性pH或接近中性pH的缓冲中活性最强。推荐反应缓冲是50mM磷酸钠，150mM NaCl（pH6.6），但多数常见的生物缓冲也适用，比如Tris或PBS。不在此pH范围（例如乙酸盐缓冲液）的缓冲也可能适用，但是孵育时间或酶量需要根据实际情况进行优化。
注意：IdeS protease 不能切割小鼠 IgG1 / IgG2b ，大鼠，猪，牛或山羊 IgG ；对于小鼠 IgG2a 和小鼠 IgG3 的切割，增加 IdeS 蛋白酶的量，需要根据实际情况进行优化，或者使用IdeZ Protease。
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运输
蓝冰运输 -
别名
IdeS Protease，IgG Specific，IdeS，Immunoglubulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes，免疫球蛋白特异性IdeS酶，免疫球蛋白IgG降解酶
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SDS-PAGESDS PAGE for IdeS Protease
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Experiment-Example曲妥珠单抗在非还原和还原条件下消化的结果。
将曲妥珠单抗（10μg）与 10 单位的 IdeS 蛋白酶在 37°C 下使用推荐的消化缓冲液（50mM 磷酸钠，150mM 氯化钠 [pH 6.6]）孵育 30 分钟。消化产物通过非还原（图 A）和还原（图 B）条件下的 SDS-PAGE 进行分析。
