流式细胞术的高通量性和多参数分析使其在免疫学研究中应用广泛。通过同时检测多个标记物,研究人员可以更全面地了解免疫细胞群体的组成和状态。
免疫细胞流式检测常用标记物
Dendritic cells
树突状细胞(Dendritic cells)是一类在成熟时具有许多树突状突起的专门从事抗原呈递的细胞,它们能够识别、摄取和处理抗原,然后将抗原肽呈递给T细胞。这种细胞在免疫系统中的作用十分关键,不仅参与固有免疫的反应,还在连接固有免疫和适应性免疫之间扮演着重要的桥梁角色。
树突状细胞可以主要分为两类:经典树突状细胞(cDC)和浆细胞样树突状细胞(pDC)。这些细胞在激活和调节免疫应答中具有不可或缺的功能,它们的存在有助于维持免疫系统的整体平衡和功能。
Fig1.This diagram highlights prominent dendritic cell subsets, including common cell markers.
Natural killer cells
自然杀伤细胞(Natural killer cells)作为固有免疫系统的重要组成部分,具有淋巴细胞的外形,然而它们不表达特异性抗原识别受体,因此无需事先被致敏,就能够直接对靶细胞进行杀伤作用。在检测人类NK细胞时,常用的表面标记物包括CD56和CD16。而在小鼠NK细胞中,常见的标志物有NK1.1和CD49b(DX5)。
T细胞的一个亚群是NKT细胞,与自然杀伤细胞(NK细胞)在表型和功能上存在一些共通之处。NKT细胞表达CD16、CD56、NK1.1、CD49b这些标记物,并且能够产生颗粒酶。因此,当对血液或组织中的NK细胞进行分类时,需要添加CD3进行阴性选择,以排除T细胞干扰。
Fig2. Human and mouse NK cell receptors.
Monocytes
单核细胞(Monocytes)起源于骨髓中髓系细胞,这些细胞源自造血干细胞。在骨髓环境中,髓样干细胞在单核细胞生长因子(M-CSF)和单核细胞生长因子的刺激下分化为前单核细胞。随后,前单核细胞经过发育过程转化为成熟的单核细胞,并持续进入循环血液中。
在单核细胞中,CD14被广泛认为是相对特异性的标记物。具体而言,CD14高表达、CD16低表达的单核细胞被视为经典单核细胞,而CD14+ CD16+细胞则被归类为非经典单核细胞。在小鼠中,常用的单核细胞标记物包括CD11b和Ly-6G(Gr-1)。
Macrophages
巨噬细胞(Macrophages)分布广泛于各种组织,根据其定位和功能特点,我们可以将巨噬细胞划分为多个亚型,包括肝脏Kupffer细胞、小胶质细胞、肺泡巨噬细胞、肾脏系膜细胞、破骨细胞、脾脏红髓巨噬细胞、以及与脂肪组织相关的巨噬细胞等。巨噬细胞在生物体内执行着吞噬功能,并且在抗感染、抗肿瘤、免疫应答以及免疫调节等过程中扮演着重要角色。根据其活化状态、功能特点以及分泌的细胞因子,巨噬细胞可以被分为经典活化的M1型巨噬细胞和选择性活化的M2型巨噬细胞。在研究中,常常使用一系列标志物来鉴定巨噬细胞。例如,CD11b、CD14、CD16、CD68、F4/80(在小鼠中)、CD80和CD86被广泛用作M1型巨噬细胞的标记物,而CD163和CD206则常被用作M2型巨噬细胞的标记物。这些巨噬细胞的分类和标记物有助于我们深入了解巨噬细胞的多样性及其在免疫和疾病过程中的功能。CD68主要在巨噬细胞的晚期内体和溶酶体中表达。为了使用CD68抗体检测巨噬细胞,需要采用固定和渗透的方法来处理细胞,以便能够对细胞内的抗原进行检测。
Fig3.Macrophage phenotype and polarization
Megakaryocytes/platelets
巨核细胞(Megakaryocytes/platelets )是一种由造血干细胞在骨髓中分化而来的细胞,其特点是能够产生血小板。血小板主要发挥着凝血功能,此外也参与免疫应答和炎症反应等生理过程。在标记巨核细胞和血小板时,常用的标志物包括CD9、CD31、CD41、CD42b、CD51、CD61和CD62P。这些标记物有助于识别和研究巨核细胞及其产物血小板的特性和功能,从而更好地了解其在凝血和免疫方面的作用。
Granulocytes
粒细胞(Granulocytes)源自骨髓中的造血干细胞,由于其核形状多变,因此被称为多形核白细胞。基于苏木精和伊红染色的特征,粒细胞可分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。在人类中,CD11b和CD16常被用作中性粒细胞的标记物。而在小鼠中,CD11b和Ly6G被用作中性粒细胞的标记物。此外,CD13、CD107a和CD107b被广泛用作嗜碱性粒细胞的激活标记物。
Red blood cells
红细胞(Red blood cells),也被称为红血球,是血液中数量最多的一类细胞,其主要功能是运输氧气和二氧化碳,除此之外还具备一定的免疫功能。在红细胞表面,CD235a被识别为一种唾液酸糖蛋白,其表达分布于红细胞的前体细胞和成熟红细胞中。而TER-119则是一种小鼠红细胞谱系特异性的单克隆抗体,其能够与红细胞的各分化阶段,从早期成红细胞到成熟红细胞,产生反应。
AntibodySystem
AntibodySystem Laboratories SAS是由ProteoGenix于2019年创立的独立品牌,专注于生命科学研究领域蛋白及抗体试剂研发生产。致力于为全球生命科学基础研究者提供高质量的蛋白,抗体产品,产品类别囊括传统多抗,经典内参抗体,标签抗体,高活性蛋白,invivo功能性抗体,低背景流式抗体,高特异性纳米抗体,特色小分子抗体,高质量磷酸化抗体,DNA/RNA抗体,PEG抗体等十余个系列;目前AntibodySystem旗下产品线涵盖48种病毒与超级细菌,寄生虫,肿瘤,老年痴呆,帕金森,变态与过敏反应,免疫抑制与免疫激活等多个领域。AntibodySystem Laboratories SAS团队开发出一系列高品质流式抗体,针对经典克隆号,以常规膜蛋白流式抗体为主,覆盖全系热门靶点。
NK cells |
|||
Target |
Clone number |
CAT. |
Species |
CD16 |
3G8 |
FHC35010 |
Human |
CD16/CD32 |
2.4G2 |
FMK22710 |
Mouse |
CD49b |
SAA0018 |
FHD23410 |
Human |
NK1.1(CD161) |
KM12.4.7 |
FHG33810 |
Human |
PK13 |
FMG33810 |
Mouse |
|
TIGIT |
SAA0153 |
FHH72410 |
Human |
CD56 |
huN901-DM1 |
FHC98510 |
Human |
CD161 |
KM12.4.7 |
FHG33810 |
Human |
PK136 |
FMG33810 |
Mouse |
|
CD314 |
SAA0098 |
FHD72110 |
Human |
Megakaryocyte cells |
|||
Target |
Clone number |
CAT. |
Species |
CD11b |
M1/70 |
FMC86630 |
Mouse |
CD11C |
N418 |
FMD41110 |
Mouse |
CD14 |
28C5 |
FHC33710 |
Human |
CD16 |
3G8 |
FHC35010 |
Human |
CD16/CD32 |
2.4G2 |
FMK22710 |
Mouse |
CD80(B7-1) |
IDEC-114 |
FHE03410 |
Human |
GL1 |
FME33810 |
Mouse |
|
CD86 |
GL1 |
FME33810 |
Mouse |
Dendritic cells |
|||
Target |
Clone number |
CAT. |
Species |
CD1a |
2113 |
FHC18710 |
Human |
CD11b |
M1/70 |
FMC86630 |
Mouse |
CD11C |
N418 |
FMD41110 |
Mouse |
CD80(B7-1) |
IDEC-114 |
FHE03410 |
Human |
16-10A1 |
FME03410 |
Mouse |
|
CD83 |
60B10 |
FHF85910 |
Human |
CD86 |
GL1 |
FME33810 |
Mouse |
HLA-DRA |
1D09C3 |
FHM00810 |
Human |
CD11b |
M1/70 |
FMC86630 |
Mouse |
END