在癌症治疗领域，肿瘤免疫微环境（TIME）的研究正逐渐揭开其神秘面纱。佰乐博生物代理的AntibodySystem流式抗体，以其高特异性和低背景信号，为TIME的研究提供了强有力的工具。最新Cell文章介绍了一种新技术——基于T-Linker的多模态靶向嵌合体（Multi-TACs），这项技术能够将多种治疗模块整合到单一分子中，为癌症免疫治疗带来了新的突破。流式抗体的应用，使得研究者能够精确检测树突状细胞表面的肿瘤抗原复合物，从而深入理解TIME中的细胞相互作用，为未来免疫治疗策略提供了新的视角。
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在人类与癌症的持久战中，免疫疗法无疑是近年来最闪亮的一颗星，凭借其独特机制为许多患者带来了长期生存的可能性。然而，面对复杂的肿瘤免疫微环境（Tumor Immune Microenvironment, TIME），即便是最具突破性的治疗方法也遭遇瓶颈。TIME是由多元化的免疫细胞网络构成的生态体系，既可能是抵抗肿瘤的前线战士，又常常扮演着阻碍免疫攻击的角色，其复杂性直接影响了免疫疗法的有效性和持久力。肿瘤内存在各种免疫抑制因子，如PD-L1、CTLA-4等检查点分子，它们能抑制T细胞活性，保护肿瘤免受免疫系统攻击。肿瘤细胞通过改变代谢途径，如乳酸积累、营养竞争等方式，影响免疫细胞功能，导致免疫抑制环境形成。
针对上述挑战，研究者们正在探索一系列新型方法，旨在重塑TIME，增强免疫疗法的效果，如免疫检查点抑制剂，靶向PD-1/PD-L1、CTLA-4等，解除免疫抑制，恢复T细胞功能，或疫苗疗法、CAR-T细胞疗法，以及联合疗法，结合不同机制药物，协同作用克服单一疗法局限性。
传统免疫疗法虽有效，却受限于其广义性，缺乏针对性。药物联用虽尝试协同增效，却易陷于毒性与效率失衡困境。双/多特异性抗体虽具优势，仍面临功能局限与灵活性不足的问题。构想一个场景：若能将免疫武器比作乐高积木，每个组件拥有独立功能，又能自由组合，岂非梦寐以求之策？
Fig.1 文章摘要图
11月5号，Cell最新出炉的文章构建了一种基于三重正交连接子（T-Linker）的可编程平台，该平台能够将多种治疗模块整合到单一的多模态靶向嵌合体（Multi-TACs）中，以实现在肿瘤-免疫微环境（TIME）中对不同免疫细胞的靶向共激活。在体外细胞以及动物模型实验中，Multi-TAC对多种实体瘤都取得了出色的疗效。陈鹏教授与北京大学席建忠教授、中国医学科学院肿瘤医院康晓征教授、南京大学李颜教授、北京大学第三医院林坚研究员为论文共同通讯作者。这一创新策略有望为癌症免疫治疗带来革命性的进展。
简单来说，文章中介绍的T-Linker技术是一种创新的化学工具，它能够将三种不同的治疗模块（如肿瘤靶向分子、免疫细胞共激活分子等）精确地整合到一个单一的多模态靶向嵌合体（Multi-TACs）中。生物正交反应使得科学家们可以在活体细胞内通过化学反应标记、操控生物分子，并且不会干扰原有的生物化学过程。这些反应的组合使得T-Linker能够高效且选择性地将不同的治疗分子连接在一起，形成具有多重功能的Multi-TACs。
Fig.2 The T-Linker technology enables modular and programmable integration of multiple therapeutic modules into single agents, termed Multi-TACs, which support multiple immune cell co-engagement in TIME
研究者们设计了多种Multi-TACs，其中包括EGFR-CD3-PDL1 Multi-TAC，它能够同时靶向肿瘤细胞上的EGFR、T细胞上的CD3以及树突状细胞上的PDL1。这种Multi-TAC通过物理方式将T细胞和树突状细胞共激活，从而在肿瘤微环境中增强了抗肿瘤免疫反应。
Fig.3 Therapeutic modules for Multi-TAC construction
研究者们在体外实验中验证了包括T-Linker技术的体外毒性，来确定T-Linker的生物相容性；Multi-TACs的构建和表征，对其进行了质谱（MS）和SDS-PAGE分析，以验证其结构和稳定性；EGFR-CD3-PDL1 Multi-TAC的体外功能评估，在A549肿瘤细胞、T细胞和树突状细胞的共培养体系中评估了EGFR-CD3-PDL1 Multi-TAC的T细胞激活能力、细胞因子分泌以及直接杀伤肿瘤细胞的效果。
Fig.4 The EGFR-CD3-PDL1 Multi-TAC enables tumor-targeted T cells and DCs co-engagement
NY-ESO-1是一种肿瘤抗原，而HLA-A0201是一种人类白细胞抗原（HLA）。通过检测HLA-A*0201/NY-ESO-1复合物，研究者们可以评估DCs是否有效地将肿瘤抗原呈递给T细胞，这是启动特异性抗肿瘤免疫反应的关键步骤。通过流式细胞术分析，研究者们能够定量DCs表面HLA-A0201/NY-ESO-1复合物的水平，观察到HLA-A0201/NY-ESO-1复合物在DCs表面的表达增加。这表明EGFR-CD3-PDL1 Multi-TAC不仅能够激活T细胞和DCs，还能够促进DCs对肿瘤抗原的有效呈递。
Fig.5 Isolated A549* cells were stained with antibodies specific for the HLA-A*0201/NY-ESO-1 complex and evaluated by flow cytometry
综上所有结果显示，EGFR-CD3-PDL1 Multi-TAC能够显著激活T细胞和树突状细胞，并促进了肿瘤抗原的呈递和特异性T细胞的激活。
研究人员评估了体内的情况，包括药物耐受性评估，在C57BL/6小鼠中评估了不同剂量EGFR-CD3-PDL1 Multi-TAC的耐受性，通过连续注射8次不同剂量的Multi-TAC，监测小鼠体重变化和主要器官的组织病理学变化。以及药代动力学研究，通过构建带有Flag标签的EGFR-CD3-PDL1 Multi-TAC（EGFR-Flag-CD3-PDL1），在C57BL/6小鼠中评估了Multi-TAC的药代动力学特性，包括血清中Multi-TAC的稳定性和半衰期。
同时，在不同的人源化小鼠模型中评估了Multi-TACs的疗效，包括PBMC人源化小鼠模型（PBMC Humanized Mice Model）、HSC人源化小鼠模型（HSC Humanized Mice Model）、转基因人源化小鼠模型（Transgenic Humanized Mice Model）、患者来源肿瘤样细胞团（PTC）模型。
Fig.6 In vivo tumor targeting and antitumor efficacy of the EGFR-CD3-PDL1 Multi-TAC in PBMC humanized mice
在体内实验的结果表明，这些Multi-TACs在抑制肿瘤生长和促进免疫细胞浸润方面表现出了显著的效果。
在本文中，佰乐博生物独家代理的AntibodySystem提供的流式抗体在评估EGFR-CD3-PDL1 Multi-TAC激活的树突状细胞（DCs）功能的研究中，通过使用针对HLA-A*0201/NY-ESO-1复合物的特异性抗体（Cat# RHM03002），研究者们能够精确地检测DCs表面呈现的肿瘤抗原复合物，这对于理解DCs在肿瘤微环境中的抗原呈递能力至关重要。AntibodySystem提供的流式抗体因其高特异性和低背景信号，为本文中的实验提供了可靠的数据支持。
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