在流式细胞术实验中，激活剂的合理使用可以有效激活细胞内特定的信号通路，从而帮助研究人员深入解析细胞的功能状态和反应机制。PMA、离子霉素、SEB、CD3和CD28等常用激活剂能够调控细胞增殖、分化和凋亡过程，通过与细胞表面受体或细胞内信号分子的作用，激发细胞对外界刺激的响应。此外，Bregeldin A（BFA）和莫能菌素（Monensin）等阻断剂，则能够抑制蛋白质的运输和分泌，有助于在特定实验中对细胞功能进行进一步探究。本文将详细介绍这些常用激活剂及其配制方法和应用策略，旨在为科研工作者在细胞激活和信号调控研究中提供有效参考。
■PMA（Phorbol 12-myristate 13-acetate）
用DMSO配制成0.1 mg/ml浓度的储存液，分装20 μl/管，-20℃保存，避免反复冻融。实验时用无菌、无叠氮钠PBS按1：100稀释储存液，终浓度为20 ng/ml。
■离子霉素（Ionomycin）
用乙醇配制成0.5 mg/ml储存液，-20℃保存。实验时用无菌、无叠氮钠PBS按1：10稀释储存液，终浓度为1 μg/ml。
■Staphylococcal enterotoxin B（SEB）
用无菌、无叠氮钠PBS配制成0.5 mg/ml储存液，4℃储存。SEB的终浓度为10 μg/ml。
■CD3
包被于培养板中，在蛋白转运抑制剂存在下活化未稀释的血液细胞。
■CD28
加速不同刺激剂（包括SEB、CD3等）的活化效应，使用浓度一般为10 μg/ml。
■阻断剂 Bregeldin A（BFA）
用DMSO配制成5 mg/ml储存液，分装20 μl/管，-20℃保存，避免反复冻融。实验时用无菌、无叠氮钠PBS按1：10稀释储存液，在激活过程最后4～5小时加入BFA，终浓度为10 μg/ml。
■阻断剂 莫能菌素（Monensin）
用DMSO配制成1 mg/ml储存液，4℃储存至少4个月。实验时用无菌、无叠氮钠PBS按1：10稀释储存液，终浓度为2 μmol/L。
